做细胞实验总翻车证券配资系统,有没有试过让细胞先饿一顿?这招“血清饥饿”简直科研玄学,一饿就灵!今天教你用“饥饿疗法”把细胞驯成乖宝宝,实验成功率嗖嗖涨~
🍽️什么是血清饥饿?简单说就是把培养基里的血清(FBS)降到0-1%,让细胞从“自助餐”切换到“轻断食”。血清里有大量生长因子,去掉后细胞会乖乖停在G0/G1期,像被按下暂停键⏸️,后续操作任你摆布!
🎯饿出五大奇效1️⃣ 同步周期,告别“各玩各的”
细胞不同步=数据乱跳?饿12-24h后,90%以上细胞同步在G0/G1,测Cyclin D1、p27等周期蛋白时,条带漂亮到飞起📈。
2️⃣ 激活凋亡/自噬,研究应激超方便
撤掉血清,细胞会启动“自救模式”:Caspase-3飙升💥、LC3-II斑点狂长,研究抗癌药或自噬诱导剂时,模型现成!
展开剩余63%3️⃣ 转染效率暴涨,质粒siRNA统统听话
细胞饿到“代谢慢”,外源DNA/RNA更容易溜进去。HEK293T饿一晚,转染效率从30%飙到80%,连难搞的悬浮细胞都服软🤝。
4️⃣ 信号通路背景清零,磷酸化蛋白一眼看清
血清里的生长因子会“污染”信号通路。先饿12h让细胞静息,再加EGF/胰岛素刺激,p-ERK、p-AKT的灰度值对比超明显🔍。
5️⃣ 模拟体内微环境,肿瘤/干细胞研究神助攻
肿瘤低营养?胚胎低氧?用0.5%血清就能复刻,癌细胞糖酵解暴走、干细胞干性维持的表型轻松拿捏🔥。
⚠️饿过头会翻车?时间浓度拿捏好! 时间:12-48h黄金期,超过48h细胞会大量凋亡💀 浓度:原代细胞娇气用0.5% FBS,HeLa这类“铁胃”可直接0%,具体细胞预实验走起! 替代方案:无血清培养基+ITS(胰岛素-转铁蛋白-硒),避免血清批次差异,细胞状态稳如老狗🐶。🛠️实操彩蛋:血清饥饿三步走1️⃣ 预处理:细胞长到70-80%汇合时,PBS轻柔洗2遍,去掉残留血清“余味”🚿
2️⃣ 饥饿:换0-1%血清培养基,贴壁细胞静置,悬浮细胞降低转速防沉淀🌀
3️⃣ 唤醒:实验前加回正常血清,细胞秒回“满血复活”状态,后续转染/加药无缝衔接⚡️
🚨常见翻车现场 细胞成片飘:饿太久?缩短时间或改用低血清💡 HeLa不敏感:快速增殖系可能无需饥饿,直接换无血清培养基即可🌿毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容:分子生物学、免疫证券配资系统, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
发布于:吉林省启灯网提示:文章来自网络,不代表本站观点。